簡要描述：DISPASE® 是切斷肽鏈的中性及非極性氨基酸N末端的金屬蛋白酶，能夠把上皮細(xì)胞從組織上剝離成片狀，可用于原代培養(yǎng)的細(xì)胞分離與分散。與yi蛋白酶和膠原酶等蛋白酶不同，DISPASE®造成的細(xì)胞損傷更少，可溫和地分散細(xì)胞，因此也被應(yīng)用于ES和iPS細(xì)胞等再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。
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產(chǎn)品分類
| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 一個(gè)月 |
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分散酶DISPASE®
DISPASE® 是切斷肽鏈的中性及非極性氨基酸N末端的金屬蛋白酶，能夠把上皮細(xì)胞從組織上剝離成片狀，可用于原代培養(yǎng)的細(xì)胞分離與分散。與yi蛋白酶和膠原酶等蛋白酶不同，DISPASE®造成的細(xì)胞損傷更少，可溫和地分散細(xì)胞，因此也被應(yīng)用于ES和iPS細(xì)胞等再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。
本產(chǎn)品不含動(dòng)物源成分。
◆產(chǎn)品信息
| DISPASE® I | DISPASE® II | |
| 特性 | 結(jié)晶酶，無菌產(chǎn)品 | 粉末酶，非無菌產(chǎn)品 |
| 包裝 | 6 小瓶 | 1 g |
| 酶活性 | 10,000-13,000 PU/小瓶 | 300,000-360,000 PU/g |
| 添加劑等 | 含有醋酸鈣 | 含有糊精和醋酸鈣 |
| 儲存方法 及有效期 | 生產(chǎn)后在 2～10℃下可儲存 2年（未開封）； 開封溶解后請凍存在-20℃以下，并在 6個(gè)月內(nèi)使用。 | |
◆優(yōu)點(diǎn)、特色
1. 來源于Paenibacillus sp. （舊名：Bacillus polymyxa）的中性金屬蛋白酶，活性中心含有Zn2+, 并使用Ca2+ 穩(wěn)定其活性。
2. 酶活性幾乎不受血清影響，無論有無血清均可使用。通過添加EDTA或者稀釋反應(yīng)液即可停止酶促反應(yīng)。
3. 可以很好地分解構(gòu)成基底膜的IV型膠原、纖連蛋白，讓上皮細(xì)胞從組織上剝離成片狀。
4. 與yi蛋白酶、膠原酶等蛋白酶的作用不同，造成的細(xì)胞損傷更少，可溫和地分散細(xì)胞。
5. 作用條件范圍廣泛，可以在不同的酶濃度、處理時(shí)間、溫度以及pH條件下起作用。
6. 在一般細(xì)胞培養(yǎng)溫度（37°C）下非常穩(wěn)定，對于某些細(xì)胞類型，添加本產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)懸浮培養(yǎng)。
7. 無動(dòng)物源成分，不含支原體。
◆作用條件
| 酶濃度 | 100～2,000 PU/mL |
| 溶解buffer | 含有Ca2+的緩沖液或者培養(yǎng)基(可含有血清) |
| 反應(yīng)時(shí)間 | 30 min~幾天 |
| 反應(yīng)溫度 | 室溫～37℃ |
| 反應(yīng)pH | 6.5～9.0 |
| 抑制劑 | EDTA, Fe3+, Fe2+, Ni2+, Cu2+, Al3+, Zn2+ |
※ 1 PU的定義是使用酪蛋白分解法1 min內(nèi)釋放1 μg酪an酸的酶活性。
◆細(xì)胞分散實(shí)驗(yàn)
◆應(yīng)用示例
應(yīng)用示例 | 使用濃度 | 反應(yīng)時(shí)間 |
從細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備上剝離人成纖維細(xì)胞薄片 | 10 PU/mL | 1 h |
從細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備上剝離人表皮細(xì)胞 | 1000 U/mL | 1 h |
分離人皮膚表皮層和真皮層 | 2000 U/mL | 1 h |
從人粘膜組織中分離上皮和真皮組織 | 1000 PU/mL | 16 h |
分離人皮膚表皮層和真皮層 | 1000 U/mL | 12 h |
分離人皮膚表皮傷口和真皮層 | 250 U/mL | 24 h |
分離人間充質(zhì)干細(xì)胞（hMSC） | 1000 U/mL | 20 min |
人牙髓組織細(xì)胞的分散 | 60 U/mL | 20 min |
從人牙髓組織中分離牙髓細(xì)胞 | 2% | 1 h |
從人口腔邊緣粘膜上皮層分離上皮細(xì)胞 | 1000 PU/ｍL | 16 h |
從小鼠、大鼠和人眼球中分離虹膜色素上皮細(xì)胞 | 1000 U/mL | 40 min |
從小鼠背部皮膚分離表皮和真皮 | 500 U/mL | 18 h |
分離小鼠皮膚表皮和真皮組織 | 500 U/mL | 16 h |
從小鼠皮膚切片剝離表皮細(xì)胞 | 5 mg/mL | 30 min |
從小鼠皮膚切片剝離表皮細(xì)胞 | 5 mg/mL | 18 h |
從大鼠空腸粘膜上剝離小腸上皮細(xì)胞 | 2 mg/L | 30min |
從兔角膜中分離角膜實(shí)質(zhì)細(xì)胞 | 1000 U/mL | 1 h |
分散魚類生殖細(xì)胞 | 1.65 mg/mL | 2 h |
※ 分散酶DISPASE® 的效果因細(xì)胞種類和培養(yǎng)狀況而異。
推薦濃度為100~2,000 PU/mL，最佳濃度需摸索。
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| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級 | 備注 |
| 386-02271 | DISPASE® Ⅰ 分散酶® | 10,000 PU x 6 | - | - |
| 383-02281 | DISPASE® Ⅱ 分散酶®Ⅱ | 1g | - | - |
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級 | 備注 |
| 038-24561 | Collagenase Type A, Animal-derived-free 膠原酶 A型，無動(dòng)物源性成分 | 100 mg | 細(xì)胞分散用 | - |
| 034-24563 | Collagenase Type A, Animal-derived-free 膠原酶 A型，無動(dòng)物源性成分 | 500 mg | 細(xì)胞分散用 | - |
| 036-23141 | Collagenase, recombinant, Animal-derived-free 膠原酶，重組，無動(dòng)物源性成分 | 240000 units | 細(xì)胞分散用 | - |
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