
簡要描述:Lyso-ID® Red cytotoxicity kit 陽離子兩親性示蹤劑(CAT)的染料,其以類似誘導(dǎo)磷脂藥物的方式迅速分到細(xì)胞中。通過在探頭(染料)上放置可滴定基團(tuán),形成此示蹤。
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| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 一個(gè)月 |
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溶酶體積聚檢測試劑盒![]()
◆原理
Lyso-ID® Red cytotoxicity kit 陽離子兩親性示蹤劑(CAT)的染料,其以類似誘導(dǎo)磷脂藥物的方式迅速分到細(xì)胞中。通過在探頭(染料)上放置可滴定基團(tuán),形成此示蹤。使標(biāo)記物擴(kuò)展到用弱堿性細(xì)胞穿透物化合物預(yù)處理的細(xì)胞層狀包涵體,如抗瘧藥lvkui。此外,溶酶體本身探頭可用于突出溶酶體樣細(xì)胞器,前提是其中的細(xì)胞產(chǎn)生包含大多數(shù)降解酶的溶酶體,非酸性母體細(xì)胞器的空泡可以監(jiān)測溶酶體降解功能的失常,使用藥物類的陽離子示蹤染料選擇性地快速染色酸性細(xì)胞器,可用于監(jiān)控活細(xì)胞內(nèi)溶酶體的積聚和溶酶體樣結(jié)構(gòu)??捎糜隗w外毒理學(xué)和臨床前藥物安全評(píng)估。 | ![]() |
◆優(yōu)點(diǎn)?特色
● 包括迅速區(qū)分細(xì)胞和標(biāo)記酸性細(xì)胞器的獨(dú)特藥物類染料的分析。
● 市面上weiyi可用于長期監(jiān)測細(xì)胞毒性作用的商業(yè)化產(chǎn)品。
● 高通量快速檢測:染料僅需10-15分鐘孵育。
● 無需與人工磷脂類似物共同培育進(jìn)行檢測,消除了混雜染料所造成偽像的可能性。
● 監(jiān)控溶酶體積累長期藥物治療的反應(yīng)。
● 定量分析,包括藥物誘導(dǎo),3個(gè)小時(shí)即可完成
◆試劑盒組成
10×雙色檢測試劑:2×1 mL
檢測緩沖液:20 mL
Verapamil 對(duì)照:3 μmoles
10×分析緩沖液:15 mL
◆案例?應(yīng)用
1、消除混雜染料所造成偽像
| 在短短15分鐘,LYSO-ID® 紅染料培養(yǎng)消除了混雜染料所造成偽像的可能性。在24小時(shí)內(nèi)U-2 OS細(xì)胞的熒光強(qiáng)度對(duì)應(yīng)不同濃度lvkui。在藥物治療期間,把用LipidTox染料(綠線)染色的細(xì)胞放在熒光脂質(zhì)中培育24小時(shí)。在藥物培育后,用LYSO-ID® Red dye(red line)或Hoechst公司產(chǎn)品33342(藍(lán)線)染色細(xì)胞15分鐘。 |
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2、激發(fā)和發(fā)射光譜
| A是LYSO-ID® Red Detection Reagent;B是Hoechst 33342細(xì)胞核染色。 |
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3、溶酶體擾動(dòng)活性治療學(xué)的高通量篩選
| 使用傳統(tǒng)的熒光酶標(biāo)儀去估測在U-2 OS細(xì)胞里維拉帕米的毒性。用維拉帕米處理U-2 OS的細(xì)胞18小時(shí)后,用LYSO-ID® Red dye染色15分鐘。高Z因子(0.87為100 μM的維拉帕米)顯示LYSO-ID® Red dye適合HTS的應(yīng)用。Hoechst可用作復(fù)染劑,歸一化控制細(xì)胞數(shù)目。 |
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4、細(xì)胞的復(fù)合亮場和熒光顯微鏡圖像
| U2-OS細(xì)胞(左),用64 μMlvkui預(yù)先處理5小時(shí)的細(xì)胞(右)。用LYSO-ID® Red dye來染色細(xì)胞10分鐘。用Hoechst 33342 染料進(jìn)行細(xì)胞核復(fù)染。 |
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5、使用LYSO-ID® Red dye來估測U-2 OS細(xì)胞藥物誘導(dǎo)的溶酶體的累積
| 這兩種化合物是陽離子和兩親性,并且可觀察到誘導(dǎo)溶酶體內(nèi)磷脂異常累積,導(dǎo)致板層體的形成。由圖中增加的紅色熒光可知,U-2 OS細(xì)胞對(duì)磷脂誘導(dǎo)藥物的處理,導(dǎo)致溶酶體數(shù)目和體積的增加。細(xì)胞核的復(fù)染用Hoechst 33342染料(藍(lán)色)。 |
(A)未處理的細(xì)胞 (B)lvbingqin,28µM (C)維拉帕米,200 µM |
| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級(jí) | 備注 |
| ENZ-51015-KP002 | Lyso-ID® Red cytotoxicity kit (GFP-Certified®) for microplates 溶酶體細(xì)胞毒理檢測試劑盒(紅色熒光)(綠色細(xì)胞系)(微孔板) | 1 kit | - | - |
| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級(jí) | 備注 |
| ENZ-51034-0100 | Lyso-ID® Green detection kit for microscopy | 100 tests | - | - |
| ENZ-51005-0100 | Lyso-ID® Red detection kit (GFP-Certified®) for microscopy | 100 tests | - | - |
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