可清洗去除的細(xì)胞染色探針

CytoSeeing<Reversible Cytoplasm Blue>

CytoSeeing是一種新型細(xì)胞染色試劑，只需添加到培養(yǎng)基即可迅速對(duì)細(xì)胞質(zhì)進(jìn)行染色。熒光觀察細(xì)胞質(zhì)后，只需更換不含CytoSeeing的培養(yǎng)基，便可輕松去除細(xì)胞內(nèi)的熒光染色。

※本產(chǎn)品基于北海道大學(xué)研究生院理學(xué)研究科的研究成果商品化而成。

※本產(chǎn)品僅供研究，研究以外不可使用。

◆關(guān)于CytoSeeing

已知細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)的形態(tài)變化與細(xì)胞分化、功能、信號(hào)反應(yīng)相關(guān)。傳統(tǒng)的細(xì)胞質(zhì)染色探針，主要作為細(xì)胞示蹤劑使用，一旦攝入細(xì)胞，即使去除培養(yǎng)基中的試劑也會(huì)殘留在細(xì)胞內(nèi)。隨后，細(xì)胞內(nèi)的染色試劑隨著細(xì)胞分裂的過(guò)程逐漸褪色，通常在3~6代左右便會(huì)消失。但是如果染色試劑殘留在細(xì)胞內(nèi)的話，實(shí)時(shí)成像觀察細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞核的形態(tài)后，難以立即使用其他探針進(jìn)行成像。

不同于傳統(tǒng)試劑，CytoSeeing是一種僅對(duì)細(xì)胞質(zhì)進(jìn)行染色且可清洗的細(xì)胞染色試劑。

參考文獻(xiàn)：

Kamada, et al., PLOS ONE, 11：e0160625(2016).

◆特點(diǎn)

●　只需添加到培養(yǎng)基即可對(duì)細(xì)胞質(zhì)進(jìn)行染色。

●　染細(xì)胞質(zhì)，但不會(huì)進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)?？梢酝ㄟ^(guò)細(xì)胞核的邊界對(duì)其進(jìn)行形態(tài)學(xué)上的觀察。例如，適用于活細(xì)胞中血細(xì)胞的細(xì)胞核形態(tài)觀察。

●　可使用DAPI濾光片進(jìn)行檢測(cè)，且能夠與GFR和RFP等綠色或紅色熒光物質(zhì)同時(shí)使用。

●　CytoSeeing的可視化不會(huì)影響細(xì)胞功能。

●　通過(guò)培養(yǎng)基或PBS清洗攝入細(xì)胞的CytoSeeing，可從細(xì)胞中去除CytoSeeing。

●　去除CytoSeeing后，可直接用于其他檢測(cè)。

●　可用于貼壁細(xì)胞與懸浮細(xì)胞。

與現(xiàn)有的細(xì)胞質(zhì)染色試劑比較

◆產(chǎn)品概述

●　分子式：C₁₇H₁₂N₃

●　分子量：258.11

●　純度：≧97％

●　激發(fā)/熒光波長(zhǎng)（Ex/Em）^*1：345 nm/456 nm

●　可溶性：DMSO^*2

*1 可通過(guò)DAPI濾光片進(jìn)行觀察。

*2 建議使用10 mM作為母液。

◆操作方法概要

1. 取適量細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)；

2. 添加CytoSeeing溶液至培養(yǎng)基中使終濃度為10 μM~50 μΜ；

3. 在適合細(xì)胞的溫度下孵育幾分鐘；

4. 使用熒光顯微鏡進(jìn)行觀察；

5. 去除CytoSeeing時(shí)，添加不含CytoSeeing的新鮮培養(yǎng)基清洗。

◆應(yīng)用實(shí)例

使用CytoSeeing對(duì)CHO細(xì)胞進(jìn)行染色

使用CytoSeeing（10 μM）對(duì)CHO細(xì)胞進(jìn)行染色30 min。整個(gè)細(xì)胞質(zhì)（cytoplasm）被染色，可以通過(guò)觀察邊界來(lái)觀察細(xì)胞核的形態(tài)。

在A549細(xì)胞中CytoSeeing的時(shí)間依賴性攝取和分布

a）添加CytoSeeing（10 μM）至細(xì)胞中，并孵育。僅需9 min，CytoSeeing已被充分?jǐn)z入到細(xì)胞內(nèi)。

b）使用CytoSeeing（10 μM）染色細(xì)胞后，更換到不含CytoSeeing的培養(yǎng)基中孵育。僅需30 min CytoSeeing便脫離細(xì)胞。

※ 本頁(yè)面產(chǎn)品僅供研究用，研究以外不可使用。